GB5009.205-2024食品安全国家标准食品中二噁英及其类似物毒性当量的测定

 

 

 

1、范围

 

     本标准规定了食品中17种2,3,7,8-取代的多氯代二苯并二噁英、多氯代二苯并呋喃(PCDD/Fs)和12种二噁英样多氯联苯(DL-PCBs)含量及其毒性当量(TEQ)(见附录A的表A.1)的测定方法。

 

    第一法“同位素稀释-气相色谱-磁式高分辨质谱法”适用于食品中17种PCDD/Fs和12种DL-PCBs含量及其TEQ的测定。

 

    第二法“同位素稀释-气相色谱-三重四极杆质谱法”适用于肉及肉制品、水产动物及其制品、乳及乳制品、蛋及蛋制品和油脂中17种PCDD/Fs和12种DL-PCBs含量及其TEQ的测定。

 

 

第一法同位素稀释-气相色谱-磁式高分辨质谱法

 

 

2、原理

 

    试样经提取、净化和浓缩后,采用气相色谱-磁式高分辨质谱仪测定,稳定性同位素稀释法定量;以各目标化合物的毒性当量因子(TEF)与所测得的含量相乘后累加,计算样品中PCDD/Fs和DL-PCBs的TEQ。

 

 

3、试剂和材料

 

3.1  试剂

 

    除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。

 

3.1.1  丙酮(C3H6O):农残级。

 

3.1.2  正己烷(C6H14):农残级。

 

3.1.3  甲苯(C7H8):农残级。

 

3.1.4  环己烷(C6H12):农残级。

 

3.1.5  二氯甲烷(CH2Cl2):农残级。

 

3.1.6  甲醇(CH3OH):色谱级。

 

3.1.7  正壬烷(C9H20):≥99%。

 

3.1.8  乙酸乙酯(CH3COOCH2CH3):农残级。

 

3.1.9  无水硫酸钠(Na2SO4):优级纯。

 

3.1.10  浓硫酸(H2SO4):优级纯。

 

3.1.11  氢氧化钠(NaOH):优级纯。

 

3.1.12  硝酸银(AgNO3):优级纯。

 

3.1.13  提取用硅藻土:堆积密度18.0g/100mL~36.0g/100mL(如EXtrelutNT,或等效产品)。

 

3.1.14  凝胶色谱填料:聚苯乙烯凝胶,38μm~75μm(如Bio-BeadsS-X3,或等效产品)。

3.1.15  硅胶:75μm~250μm。

 

3.1.16  碱性氧化铝:63μm~200μm(如EcoChromTMMPAluminaB-SuperI,或等效产品)。

 

3.1.17  弗罗里土:150μm~250μm。

 

3.1.18  活性炭:150μm~180μm(如CarbopackC,Supelco10258,或等效产品)。

 

3.1.19  净化用硅藻土:26μm(如Celite545AW,Supelco20199-U,或等效产品)。

 

3.2试剂配制

 

3.2.1  活性硅胶:硅胶先后用甲醇和二氯甲烷清洗,待溶剂挥干后在600°C下至少烘烤12h,临用现配。

 

3.2.2  酸化硅胶(44%,质量分数):称取112.0g活性硅胶于250mL具塞磨口旋转烧瓶中,加入88.0g浓硫酸,密闭后置于摇床上振荡,直至硅胶呈均匀流动状态,临用现配。

 

3.2.3  碱化硅胶(33%,质量分数):称取100.0g活性硅胶于250mL具塞磨口旋转烧瓶中,加入49.0g1mol/L氢氧化钠溶液,密闭后置于摇床上振荡,直至硅胶呈均匀流动状态,临用现配。

 

3.2.4  硝酸银硅胶:称取10.0g硝酸银于250mL具塞磨口旋转烧瓶中,加入40mL水使之溶解,再慢慢加入90.0g活性硅胶,密闭后置于摇床上振荡,直至硅胶呈均匀流动状态,临用现配。

 

3.2.5  碱性氧化铝:取碱性氧化铝在600°C下活化24h,临用现制。

 

3.2.6  含水弗罗里土(1%,质量分数):取适量弗罗里土装入索氏提取器中,用正己烷∶二氯甲烷(1∶1,体积比)提取24h,待溶剂挥干后,称取99.0g,加入1.0mL水,在密闭容器中(如具塞玻璃烧瓶或具塞玻璃三角瓶)混合均匀,临用现配。

 

3.2.7  混合活性炭:称取9.0g活性炭和41.0g净化用硅藻土,在密闭容器中(如具塞玻璃烧瓶或具塞玻璃三角瓶)混和均匀,然后130°C活化6h,临用现配。

 

3.2.8  无水硫酸钠:取无水硫酸钠在660°C下灼烧6h,临用现制。

 

 

3.3  标准溶液

 

3.3.1  分离度检查标准溶液:含有天然PCDD/Fs的溶液,具体化合物和浓度见附录B的表B.1。

 

3.3.2  PCDD/Fs同位素标记定量内标标准溶液:含15种13C12-PCDD/Fs的溶液,具体化合物及浓度见表B.2。

 

3.3.3  PCDD/Fs同位素标记回收率内标标准溶液:含13C12-1,2,3,4-TCDD和13C12-1,2,3,7,8,9-HxCDD的溶液,具体浓度见表B.3。

 

3.3.4  PCDD/Fs校正标准溶液:含有天然和同位素标记的PCDD/Fs系列校正曲线标准溶液,具体化合物及浓度见表B.4。

 

3.3.5  DL-PCBs同位素标记定量内标标准溶液:含12种13C12-DL-PCBs的溶液,具体化合物和浓度见表B.5。

 

3.3.6  DL-PCBs同位素标记回收率内标标准溶液:含13C12-PCB70、13C12-PCB111和13C12-PCB170溶液,具体浓度见表B.6。

 

3.3.7  DL-PCBs校正标准溶液:含有天然和同位素标记的DL-PCBs系列校正曲线标准溶液,具体化合物及浓度见表B.7。

 

3.3.8  灵敏度检查标准溶液:含有天然和同位素标记的PCDD/Fs系列标准溶液,具体化合物及浓度见表B.8。注:标准溶液于室温下避光保存,保存期为6年。

 

 

4、仪器和设备

 

4.1   气相色谱-磁式高分辨质谱仪(GC-HRMS)。

 

4.2  天平:感量为0.1g和0.001g。

 

4.3  组织匀浆器。

 

4.4  粉碎机。

 

4.5  冷冻干燥机。

 

4.6  旋转蒸发仪。

 

4.7  氮气浓缩器。

 

4.8  超声波清洗器。

 

4.9  摇床。

 

4.10  索氏提取器,配备提取套筒。

 

4.11  加速溶剂提取仪(可选)。

 

4.12  马弗炉:能够在200°C~700°C范围内保持恒温(±10°C)。

 

4.13  烘箱:能够在105°C~250°C范围内保持恒温(±5°C)。

 

4.14  玻璃层析柱:带聚四氟乙烯柱塞,150mm(长)×8mm(内径),300mm(长)×15mm(内径)。

 

4.15  全自动样品净化系统:配备酸碱复合硅胶柱、碱性氧化铝柱和活性炭净化柱。

 

4.16  凝胶渗透色谱柱(GPC):玻璃柱(内径15mm~20mm),内装50gS-X3凝胶,或等效全自动GPC。

 

 

5、分析步骤

 

5.1  试样制备

 

5.1.1  一般食品样品:干制食品粉碎均匀后,称取10g~20g(精确到0.01g)备用;乳粉称取15g(精确到0.01g)备用;其他样品匀质化后,称取50g~200g(精确到0.01g),经过冷冻干燥后备用。

 

5.1.2  油脂样品:直接称取5g样品(精确到0.01g)于茄形瓶中,加入PCDD/Fs和DL-PCBs同位素标记定量内标标准溶液各10μL,待净化。

 

5.2  提取

 

5.2.1  索氏提取

 

提取前,在索氏提取器(4.10)中装入一支空的提取套筒,以正己烷∶二氯甲烷(1∶1,体积比)为提取溶剂,以3次/h~4次/h的回流速度预提取8h后取出晾干。将试样(5.1.1)置于陶瓷研钵中,加入无水硫酸钠研磨,制成能自由流动的粉末。转移至预先清洗的套筒中,分别加入PCDD/Fs和DL-PCBs同位素标记定量内标标准溶液各10μL,用玻璃棉盖住样品,平衡30min后装入索氏提取器中,以正己烷∶二氯甲烷(1∶1,体积比)为提取溶剂,以3次/h~4次/h的回流速度提取18h~24h。

 

5.2.2  加速溶剂提取

 

将试样(5.1.1)置于陶瓷研钵中,研磨后与适量硅藻土混合均匀,转移至提取池中,分别加入PCDD/Fs和DL-PCBs同位素标记定量内标标准溶液各10μL,密闭后置于加速溶剂提取仪上提取,提取参考条件为:提取溶剂:正己烷∶二氯甲烷(1∶1,体积比);压力:10.3MPa;温度:150°C;静态提取时间:10min;循环1次。

 

 

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